Mens Gru, en forhenværende skurk, er ved at tilpasse sig familielivet i et forsøg på at leve et hæderligt liv i syltetøjsbranchen, bliver et hemmeligt arktisk laboratorium stjålet. Antiskurkeforbundet beslutter sig for at søge hjælp hos en insider og rekrutterer en modvillig Gru, som skal hjælpe dem. Sammen med den excentriske antiskurkeagent Lucy Wilde kommer Gru frem til, at hans hovedmistænkte er den formodede døde superskurk El Macho, hvis teenagesøn også lægger an på hans ældste datter Margo. Gru er tilsyneladende blændet af sin trang til overbeskyttelse af sine børn og den voksende tiltrækning af Lucy og synes at være kommet på det forkerte spor, selv da hans håndlangere stille og roligt bliver kidnappet i hobetal af en eller anden ondsindet årsag ...
